В очікуванні епідемії грипу сезону 2018–2019 рр. в Україні


Відомо, що грип спричинює щорічні епідемії, а також періодичні пандемії, коли в епідемічний процес залучаються всі країни планети. У 2018 р. виповнилося 100 років від початку наймасштабнішої та найбільш згубної пандемії грипу – так званої іспанки, коли третина населення планети була інфікована, а принаймні 10 млн людей, за підрахунками на 1920 р., померли.

Перша в ХХІ ст. пандемія грипу, що трапилась у 2009 р., призвела до чисельних людських жертв та завдала значних економічних збитків у всіх країнах світу. Найбільше потерпіли від неї країни з низьким та середнім рівнем доходу, до яких належить і наша країна.

Оскільки точно прогнозувати неможливо, коли саме станеться чергова пандемія і який новий небезпечний вірус грипу з’явиться, людство усвідомило необхідність завчасної підготовки до наступної пандемії. У зв’язку з цим Всесвітня організація охорони здоров’я (ВООЗ) вже наразі проводить ретельну роботу з підготовки до пандемії. В країнах мають бути розроблені та узгоджені спеціальні плани готовності [1]. Ключовою ланкою в підготовці до пандемії грипу є надійно працююча система епідеміологічного нагляду за грипом в країнах [2].

Матеріали та методи дослідження

Епідеміологічний аналіз сезону грипу 2017-2018 рр. був проведений на основі щотижневих звітів про випадки з ознаками грипоподібних захворювань (ГПЗ) та тяжких гострих респіраторних захворювань (ТГРЗ) (2 328 випадків) за даними системи дозорного епіднагляду, якій запроваджено в Україні з 2007 р. і здійснюється у 4 містах: Дніпро, Київ, Одеса та Хмельницький (електронна база www.ukrinfluenza.com.ua). Для дослідження використовували зразки від хворих на ГПЗ та ТГРЗ (мазок з носа, носоглотки або ротоглотки), секційний матеріал від померлих (зразки трахеї або легень) та ізоляти вірусів грипу, що надходили з вірусологічних лабораторій дозорних центрів.

Молекулярно-генетичним методом (ПЛР в режимі реального часу) було досліджено 1 095 зразків від хворих на ГПЗ та ТГРЗ за допомогою стандартного протоколу із застосуванням тест-систем: QIAamp® Viral RNA Mini Kit, виробник QIAGEN. Ізоляцію та накопичення вірусів грипу проводили на культурі клітин (КК) MDCK, отриманій з нирки самки кокер-спаніеля (S. H. Madin, N. B. Darby) [3]. За морфологією КК є епітеліоподібними клітинами. Також ізоляти, позитивні в ПЛР, виділяли на генетично-модифікованій КК MDCK-SIAT, одержаній зі Світового центру грипу (Атланта) [4]. В епідемічному сезоні 2017-2018 рр. на КК MDCK-SIAT було виділено 259 ізолятів вірусу грипу.

Секвенування генів, виділених в Україні вірусів грипу типу В та субтипів А(H3N2), а також пандемічних А(H1N1) pdm09 було здійснене у двох світових центрах грипу – в м. Атланті (CDC, США) та в м. Лондоні – з використанням технології RNA-SEQ, що дає можливість секвенувати кодуючі та некодуючі мРНК. Для проведення генотипового аналізу застосовували програмне забезпечення пакету програм MEGA 7.0 [5].

Результати дослідження та їх обговорення

Епідемічний сезон грипу 2017-2018 рр. в Україні був невисокої інтенсивності, порівняно з двома попередніми. За кількістю перехворілих, в тому числі на тяжкі форми грипу, він був удвічі нижчим, ніж попередній. За офіційними даними МОЗ, від грипу цього сезону померло 7 людей.

Рис. 1. Динаміка реєстрованих випадків, що відповідають визначенню ГПЗ, та кількість підтверджених випадків грипу в 4 дозорних центрах України у сезоні 2017–2018 рр.

Рис. 1. Динаміка реєстрованих випадків, що відповідають визначенню ГПЗ, та кількість підтверджених випадків грипу в 4 дозорних центрах України у сезоні 2017–2018 рр.

Лабораторно підтверджена циркуляція вірусів грипу в країні, за даними дозорного епіднагляду, почалася на 45-му тижні 2017 р., що відповідає 2-му тижню листопада. Пік захворюваності прийшовся на 7-й тиждень 2018 р. Як видно на рис. 1, пік лабораторних підтверджень ГПЗ прийшовся саме на 7-й тиждень 2018 р., як, власне, і найбільша кількість випадків ГПЗ.

Фактично синхронною була динаміка ТГРЗ і кількості лабораторних підтверджень грипозної етіології у хворих в минулому сезоні. Пік також прийшовся на 7-й тиждень року (рис. 2).

Рис. 2. Динаміка реєстрованих випадків ТГРЗ та кількість лабораторних підтверджень грипу в 4 дозорних центрах України у сезоні 2017–2018 рр.

Рис. 2. Динаміка реєстрованих випадків ТГРЗ та кількість лабораторних підтверджень грипу в 4 дозорних центрах України у сезоні 2017–2018 рр.

У більшості хворих причиною хвороби був вірус грипу типу В генетичної лінії В/Вікторія, який і став провідним збудником цієї епідемії.

З 40-го тижня 2017 р. по 20-й тиждень 2018 р. методом ПЛР було обстежено 1 075 зразків від хворих на ГПЗ та ТГРЗ, з них 41% були позитивними на грип. З початку сезону лабораторно підтверджено: 11 – грип А (не субтипований), 22 – грип А(Н1) рdm, 25 – А(Н3), 383 – грип В. З усіх вірусів грипу В, для яких була визначена генетична лінія, 74% належалидо B/Victoria, а 26% – до В/Yamagata (рис. 3).

Рис. 3. Етіологічна структура популяції вірусів грипу сезону 2017 – 2018 рр. за результатами ПЛР в 4 дозорних центрах України

Рис. 3. Етіологічна структура популяції вірусів грипу сезону 2017 – 2018 рр. за результатами ПЛР в 4 дозорних центрах України

З метою візуалізації генетичних змін, що відбулися у вірусах, нами були побудовані філогенетичні дерева, так звані дендрограми – одна з них представлена в медіафайлі.

Традиційно мінливість вірусів грипу В значно менша за таку у вірусів грипу А. З дендрограми видно, що група вірусів грипу В останніх двох сезонів має всього три заміщення в гемаглютиніні, які відрізняють їх від ізолятів 2011-2012 рр.

Переважна більшість секвенованих українських ізолятів поточного сезону, а це віруси з Дніпра, Києва та Харкова, були максимально схожими між собою і розташувались компактно на дереві. Пошук подібних ізолятів показав, що «найближчими родичами» виявились віруси переважно з Азії та Америки. В нашого штаму з Дніпра виявили одиночне заміщення P172L.

Два київські ізоляти виявились відмінними від основної групи і разом зі штамами з різних міст США закріпили три нові амінокислотні заміщення. Більше того, тільки в цих вірусів було виявлено заміщення R412K. З великою ймовірністю ці ізоляти були занесені із Сполучених Штатів Америки під час епідемічного сезону.

Послідовності 32 секвенованих у двох світових центрах грипу українських ізолятів сезону 2017-2018 рр. внесено до світової бази даних GISAID. Зокрема, 1 вірус грипу А(Н3N2), 29 вірусів грипу типу В генетичної гілки В/Вікторія та 2 віруси грипу В генетичної гілки В/Ямагата/88.

Антигенний та генетичний аналіз ізолятів показав, що пандемічні віруси грипу A(H1N1) pdm09, як і в минулому сезоні, мали низьку активність як в Україні, так і світі. Більшість ізолятів були антигенно подібними до вакцинного вірусу A/Michigan/45/2015. Ізолят грипу А(H3N2) A/Kyiv/7/2018 виявився більш подібним до нового вакцинного штаму A/Сінгапур/INFIMH-16-0019/2016 (H3N2), аніж до актуального для даного сезону А/Гонгконг/4801/2014, і розташувався в межах генетичного кластера 3С.2а. Віруси грипу В генетичної гілки B/Victoria набули мінімальної кількості генетичних заміщень і були подібними до вакцинного штаму. Мінливість вірусів В/Yamagata також була низькою, про що свідчить набуття великою групою ізолятів всього 3 нових амінокислотних замін у послідовності гемаглютиніну, в порівнянні з вакцинним штамом В/Пхукет/3073/2013. Незначна частина ізолятів, серед яких штам В/Kyiv/9/2018, показали додатково заміщення P31Q і K253S.

Слід зазначити, що в сезоні 2017-2018 рр. в країнах Європи, навпаки, переважала циркуляція вірусів грипу В лінії В/Yamagata [6]. У Сполучених Штатах Америки, навпаки, переважним збудником епідемії був вірус А(H3N2), а саме штам, що був подібним до А/Гонконг/4801/2014.

Отже, минулий епідемічний сезон грипу в Україні був низької інтенсивності. Незважаючи на домінування вірусу грипу В лінії B/Victoria, а саме старого штаму В/Брізбен/60/2008, сезон був досить різноманітним за складом циркулюючих вірусів.

Як відомо, штамовий склад грипозних вакцин змінюється щороку відповідно до рекомендацій ВООЗ. У наступному епідемічному сезоні 2018-2019 рр. за рекомендацією ВООЗ [7] до складу трикомпонентних грипозних вакцин будуть включені такі штами:

• А/Мічиган/45/2015 – A(H1N1) pdm09;
• А/Сінгапур/INFIMH-16-0019/2016 – A(H3N2);
• B/Колорадо/06/2017 (генетична гілка В/Вікторія/2/87).

З високим ступенем вірогідності штам А/Сінгапур/INFIMH-16-0019/2016 – A(H3N2) може стати провідним збудником наступної епідемії 2018-2019 рр. Штам А/Мічиган/45/2015 – A(H1N1) pdm09 також може брати участь в епідемії, але його роль не буде провідною. Найменша вірогідність стати провідним збудником епідемії у вірусу грипу типу В, що подібний до B/Колорадо/06/2017. Цей вірус має делеції в амінокислотних залишках у двох положеннях гемаглютиніну (162 та 163), але поки що в Україні не зустрічався.

Таким чином, спираючись на рекомендації ВООЗ, в передепідемічному сезоні 2018-2019 рр. рекомендовано проводити щеплення особам, що належать до груп ризику несприятливих наслідків грипу, зареєстрованими грипозними вакцинами з метою уникнення ускладнень та можливих летальних випадків. Такими особами є: люди старше 65 років, хворі будь-якого віку, що перебувають у стаціонарних медичних установах; вагітні; діти до 3 років; діти та підлітки, що одержують тривалу терапію ацетилсаліциловою кислотою; пацієнти з хронічними захворюваннями легенів (в тому числіз бронхіальною астмою) або серцево-судинної системи; пацієнти з порушенням обміну речовин, у тому числі цукровим діабетом; хворі на стафілококову інфекцію; пацієнти з імунною недостатністю; пацієнти з ожирінням та бронхіальною астмою.

Список літератури

1. http://www.who.int/influenza/pip/en/.

2. Strategy to Enhance Influenza Surveillance Worldwide / J. R. Ortiz, V. Sotomayor, O. C. Uez, O. Oliva, D. Bettels, M. McCarron, J. S. Bresee, A. W. Mounts. Emerging Infectious Diseases. www.cdc.gov/eid. 2009. Vol. 15. No. 8. Р.1271-78.

3. Рекомендації Центру грипу в Атланті, США щодо використання в практиці вірусологічних лабораторій КК з метою виділення вірусів грипу. 1997. 10 с.

4. Oh D. Y. MDCK-SIAT1 cells show improved isolation rates for recent human influenza viruses compared to conventional MDCK cells / D. Y. Oh, I. G. Barr, J. A. Mosse, K. L. Laurie. J Clin Microbiol. 2008. 46, № 7. P. 2189-94.

5. Tamura K. MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likelihood, Evolutionary Distance, and Maximum Parsimony Methods / K. Tamura, D. Peterson, N. Peterson, G. Stecher, M. Nei, S. Kumar. Mol Biol Evol. 2011. 28, N10. P. 2731-2739.

6. http://flunewseurope.org.

7. http://www.who.int/influenza/vaccines/virus/recommendations/201802.

В ожидании эпидемии гриппа сезона 2018-2019 гг. В Украине

А.П. Мироненко, О.С. Голубка, Л.В. Лейбенко, Л.В. Радченко, А.Ю. Фесенко, О.В. Онищенко, А.Ю. Смутько
ГУ «Институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л. В. Громашевского НАМН Украины»

Резюме

Работа посвящена итогам сезона гриппа 2017-2018гг. в Украине и прогнозу на следующий эпидемический сезон для страны. Сезон гриппа 2017-2018гг. в Украине был менее интенсивным как по количеству заболевших, так и по числу летальных случаев по сравнению с сезоном 2016-2017гг. Отличался он также и ведущим возбудителем: это был вирус гриппа В генетической линии В/Виктория, а именноштамм В/Бризбен/60/2008. Этот штамм входил в состав гриппозных вакцин. На сезон гриппа 2018-2019гг. в Украине прогнозируется средний уровень эпидемического подъема с возможным ведущим достаточно новым для населения Украины вирусом гриппа А/Сингапур/INFIMH-16-0019/2016 (H3N2).

Ключевые слова: вирус гриппа, дозорный эпиднадзор, прогноз эпидемии.

The Results of the Influenza Epidemic Season in Ukraine in 2016-2017 and forecast for the next season 2017-2018

A.P. Mironenko, O.S. Holubka, L.V. Leibenko, L.V. Radchenko, A.Y. Fesenko, O.V. Onyschenko, O.Y. Smutko
SI «L. V. Gromashevsky Institute of Epidemiology and Infectious Diseases of NAMS of Ukraine»

Abstract

The work is devoted to the results of the influenza season 2017-2018 in Ukraine and the forecast for the next epidemic season for the country. Influenza season 2017-2018 was less intense both in the number of cases and in the number of deaths compared to the 2016-2017 season in Ukraine. This season was also different by the main virus: it was the strain В/Brisbane/60/2008, which is belongs to B/Victoria linage. This strain was included in influenza vaccines. We expected the medium level of epidemic in the next influenza season 2018-2019 in Ukraine. The main virus may be new А/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 (H3N2).

Key words: influenza virus, sentinel surveillance, forecast of epidemy.